酸性磷酸酶染色

（acid phosphatase stain,ACP）

正常值

细胞质内出现紫红色颗粒为阳性。

正常粒细胞除原粒阴性外，其余各阶段呈弱至中度阳性，单核细胞为弱至强阳性，红系为阴性，淋巴细胞可呈弱阳性，浆细胞和巨核细胞可呈中度阳性，网状细胞、吞噬细胞、组织嗜碱性细胞可呈阳性。

影响因素

1. 血液细胞内酸性磷酸酶的反应最佳pH为4. 5~5. 5，由于方法不同，工作液的配置须用酸度计进行测定，以免阳性强度受影响，甚至无阳性出现。

2. ACP染色结果以弥散状阳性出现的细胞较多。如为弱阳性反应，在复染时应注意在涂片纵向复染一半，另一半不复染，以利弱阳性的观察。

临床解读

1. 帮助诊断毛细胞性白血病

毛细胞性白血病可呈较强的阳性反应，且不被L-酒石酸所抑制，淋巴瘤细胞和慢性淋巴细胞白血病淋巴细胞ACP染色也呈阳性反应，但被L-酒石酸所抑制。

2. 鉴别T淋巴细胞和B淋巴细胞

前者呈阳性反应，后者阴性。

3. 鉴别细胞

鉴别戈谢细胞和尼曼－匹克细胞，前者强阳性，后者阴性。鉴别浆细胞、多发性骨髓瘤与异常淋巴细胞，前者呈阳性或强阳性，后者呈阴性。

铁粒染色

（iron granules staining）

正常值

骨髓铁可染成蓝色颗粒、小珠及小块。

细胞外铁正常为（十）～（十十）。

细胞内铁正常阳性率为0. 12~0. 44，细胞质内常见1~5个铁染色颗粒。

影响因素

（1）标本取材要满意。外铁检查要选择含有骨髓小粒的涂片。

（2）所用玻片一定要清洁无污，需经无铁处理，除去载玻片上可能存在的污染铁，此点对外铁检测特别重要。

（3）试剂要新鲜配置，浓盐酸与亚铁氰化钾的比例要准确。

（4）最好用放骨髓液的原片做铁染色，观察时要仔细。

（5）细胞内铁计算积分时以中晚幼红为准，原红和早幼红不计入百分比内。

临床解读

1. 诊断缺铁性贫血

细胞外铁减低或消失，细胞内铁在缺铁早期不减少或轻度减少，重症贫血时，内铁明显减少甚至为阴性。经铁剂治疗有效后，外铁迅速增加。

2. 诊断铁粒幼细胞性贫血

出现环形铁粒幼细胞量增多，常＞15%,细胞外铁增多。

3. 非缺铁性贫血

临床常见的有，溶血性贫血、巨幼细胞贫血、再生障碍性贫血、骨髓增生异常综合征、白血病等，均可引起细胞内外铁的增多。感染、肝硬化、慢性肾炎、尿毒症及多次输血者骨髓外铁增加。

氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色

（naphthol-AS-D chloracetateesterase stain, AS-DCE）

正常值

阳性反应为细胞质中出现红宝石色颗粒。中性粒细胞（除原粒细胞外）可呈阳性反应，但酶活性并不随细胞成熟而增强。嗜酸性和嗜碱性粒细胞为阴性，嗜碱性细胞偶可呈弱阳性。肥大细胞有时可呈阳性反应。巨核细胞、淋巴细胞、浆细胞、幼红细胞、血小板为阴性。

影响因素

（1）标本必须新鲜，取材后如无法及时染色可先行固定。

（2）氯化醋酸萘酚酯酶（NCE）最佳反应pH为7. 0~7. 6。

（3）严格遵守操作规程，若温度升高和pH增加可导致氯化醋酸萘酚水解，从而在细胞内产生明显的非特异性酯酶反应。

临床解读

1. 用于鉴别急性白血病类型

急性粒细胞白血病大多呈阳性反应，急性单核细胞、淋巴细胞白血病时呈阴性，急性粒－单细胞白血病部分（原粒和早幼粒细胞）呈阳性，部分（原单核细胞和幼单核细胞）呈阴性。

2. 鉴别嗜碱性粒细胞与肥大细胞

前者阴性，后者阳性。

非特异性酯酶染色

（nonspecific esterase stain）

常用非特异性酯酶有α-乙酸萘酚酯酶（α-naphtholacetateesterase, α-NAE）、醋酸AS-D萘酚酯酶（naphtholAS-Dacetateesterase,AS-DAE）、α-丁酸萘酚酯酶（α-naphthol butyrase esterase, α-NBE）等。

正常值

细胞质中出现棕黄色颗粒为阳性。在单核细胞、吞噬细胞中此类酶的含量较多且多数受到氟化钠（NaF）抑制；粒细胞、淋巴细胞、部分幼红细胞、巨核细胞和血小板等呈阴性，如有阳性，则不被NaF抑制。

影响因素

1. 酶的活性随标本采集后的时间而逐渐下降，应取材2d内染色。

2. α-NAE最佳反应pH为6. 0~6. 3。

3. 染色时间和温度要相对恒定。

4. 各种基质试剂由于其产品衍生物较多，染色效果可随产地、生产厂商及批号不同等因素相差甚远，所以每次操作应设阴、阳性对照。

5. 在酯酶染色反应中切忌基质浓度过高，以防引起背景污染，冲洗困难，特别在冬天，易使涂片表面产生脂质沉淀，影响结果观察。

临床解读

1. 非特异性酯酶又称单核细胞酯酶，主要存在于单核细胞和组织细胞内，正常单核细胞各阶段均呈阳性，且可被氟化钠抑制。

2. 急性粒细胞白血病可呈阳性或弱阳性，急性早幼粒细胞白血病细胞呈强阳性，但不被氟化钠抑制。

3. 急性淋巴细胞白血病一般为阴性。