过氧化物酶染色
（peroxidase stain,POX)

正常值

细胞质中有蓝黑色颗粒者为阳性。

过氧化物酶主要存在于粒细胞中，除早期粒细胞外，其余各阶段均呈阳性反应，细胞越成熟，POX阳性程度越强。单核细胞从幼单核细胞起呈弥散细颗粒状弱阳性。各阶段淋巴细胞、巨核细胞、红细胞等均呈阴性。

影响因素

1.标本要求新鲜，放置过久细胞内过氧化物酶易消失。

2.溶血的标本易使背景产生许多难以去除的杂质颗粒。

3.标本在未染色前不能沾甲醇和氧化剂类试剂，以免细胞内的过氧化物酶被抑制和破坏。

4.过氧化物酶反应的最佳pH一般在6. 5左右，若将试剂应用液控制在此pH，则染色效果较佳。

5.过氧化氢液体的浓度过高会抑制酶作用，过低则失去应起的作用，使阳性程度减弱。过氧化氢的浓度以将其滴在血膜上产生微小气泡为准。

6.每次染色均应设阴性和阳性标本对照，如有疑问，则需要复测。

临床解读

过氧化物酶染色主要用于鉴别白血病的类型：急性粒细胞白血病多呈阳性，急性单核细胞白血病多呈弱阳性，急性淋巴细胞白血病则呈阴性。通常将POX染色阳性率3%作为淋巴细胞与非淋巴细胞的分界标准，小原粒细胞白血病与急性淋巴细胞白血病细胞在形态上很难鉴别，前者POX阳性率常＞10%，后者＜3%。异常组织细胞和单核细胞，前者呈POX染色阴性。

苏丹黑B染色
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（sudan black B stain,SB)

正常值

阳性产物为黑色或蓝黑色颗粒定位于细胞质中。

粒细胞除原粒细胞外，均可见阳性颗粒，嗜酸性粒细胞呈泡状阳性；单核细胞大多呈弱阳性反应，其颗粒细小，散在分布；淋巴细胞、幼红细胞、巨核细胞和血小板呈阴性反应。

影响因素

1.苏丹黑B储存液配好后，染料充分溶解后再用。

2.苏丹黑B储存液为无水乙醇所配，易挥发，所以容器封闭性能要好，并置4℃冰箱保存。

3.苏丹黑B染色液可用1~2个月，如发生沉淀、由蓝色变为褐色，则不宜再用。

4.缓冲液在临用前应混匀，对结果方能无影响。

5.避免部分脂肪溶解，涂片在染色前勿沾上丙酮、乙醚、氯仿等溶剂。

临床解读

SB染色与POX结果相似，但SB较POX更敏感，SB染色主要应用各种急性白血病的鉴别。急性粒细胞白血病原粒细胞呈阴性反应，少数阳性：早幼粒细胞呈阳性反应。急性淋巴细胞白血病各期淋巴细胞均为阴性。急性单核细胞白血病的原单核细胞为阴性，少数为少而细小的阳性。再生障碍性贫血时成熟中性粒细胞的阳性程度增高；慢性粒细胞白血病、霍奇金病、恶性贫血可见阳性减弱；戈谢细胞呈弱阳性；尼曼－匹克细胞呈中等阳性。再生障碍性贫血时阳性增多。

中性粒细胞碱性磷酸酶染色
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（neutrophil alkaline posphatase stain,NAP)

正常值

中性粒细胞碱性磷酸酶积分参考范围：Kaplow法35~100分。阳性结果为胞质内出现灰褐色至深黑色颗粒状或片状沉淀。各实验室条件不同，参考值有差异，应建立自己的实验室参考值。

影响因素

1.标本要求新鲜，标本放置过久酶活性降低。

2.固定液以10%甲醛甲醇固定液为好。

3.基质液必须新鲜配制，pH以9. 5为宜，pH<9时酶活力下降，pH>10时细胞易破碎，酶扩散，造成假阴性。

4.环境条件可干扰本试验，每次染色均应设阴性、阳性对照。

临床解读

1.生理变化

NAP活性受肾上腺皮质激素、雌激素影响较大，因此新生儿NAP活性较高，以后逐渐下降；妊娠和月经周期的变化可使NAP的活力有所差异；应激状态下（紧张、恐惧、激烈运动等）NAP积分可增高。

2.病理变化

（1）严重的化脓性感染，球菌性感染较杆菌性感染高；烧伤、中毒、手术后、外伤等均可使NAP活力升高。

（2）鉴别白血病类型：慢性粒细胞白血病与类白血病反应，前者NAP活性降低，后者升高；急性粒细胞白血病NAP活性降低，而急性淋巴细胞白血病NAP活力增高；再生障碍性贫血NAP活力持续增加，而阵发性睡眠性血红蛋白尿降低；真性红细胞增多症NAP活力持续增加，而继发性红细胞增多症NAP积分正常或降低；恶性组织细胞白血病NAP积分明显减低，而反应性组织细胞增多时NAP积分往往增高。

过碘酸－雪夫反应
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（periodic acid schiff reaction,PAS)

正常值

糖原在细胞质中为红色或紫红色，呈弥散状、颗粒状或块状。细胞质内无色或无颗粒为阴性。

1.粒细胞系统  原粒细胞呈阴性，自早幼粒细胞以后随细胞成熟阳性反应逐渐增强，中性分叶核粒细胞最强。嗜碱性粒细胞呈阳性，嗜酸性粒细胞颗粒不着色，但颗粒间的细胞质呈现红色。

2.单核细胞系  可见细胞质内呈弥散伴细小颗粒状红色阳性。

3.淋巴细胞系  T细胞仅一小部分可呈粗颗粒和小块状阳性，但B细胞绝大部分呈阳性反应。

4.红细胞系  正常人红细胞系的各个阶段皆呈阴性反应，病理性幼红细胞为阳性。

5.巨核细胞  呈阳性。

6.巨噬细胞  可呈阳性反应，浆细胞呈阴性反应。

影响因素

（1）Schiff染液变红不能再用。

（2）标本和使用器材应避免带醛基和还原基团的物质污染，以免出现假阳性。

（3）品红质量要求严格，若品红质量不佳，多加活性炭红色也不能被吸收。

（4）过碘酸易潮解，若潮解则氧化效果明显下降。

（5）涂片经过碘酸氧化水洗后，必须底部干燥后方可置入品红液中，胞间隙中的残留水分导致整张涂片呈鲜红色，影响结果观察。

（6）染色后的标本不能久置，8d后逐渐退色，应及时观察结果。

（7）染色时间和温度应相对恒定。

临床解读

PAS染色主要用于血液病的鉴别诊断。

1.红细胞系血液病

红血病和红白血病及部分重型珠蛋白生成障碍性贫血、缺铁性贫血等疾病中可呈强阳性反应，其他类型的贫血如巨幼细胞贫血、再生障碍性贫血为阴性反应。

2.白细胞系血液病

急性粒细胞白血病呈阴性或弱阳性反应，急性单核细胞白血病呈阳性反应，颗粒小而多，弥散分布，胞质边缘伪足处颗粒明显。淋巴系统恶性增生性疾病如淋巴瘤、霍奇金病，急、慢性淋巴细胞白血病等淋巴细胞PAS积分明显增加。

3.鉴别不典型巨核细胞和霍奇金细胞

前者呈粗大紫红色颗粒或块阳性，后者弱阳性或阴性。

4.用于戈谢细胞与尼曼－匹克细胞的鉴别

前者多呈强阳性，后者呈阴性或弱阳性；用于瑞－斯（Reed-Sternberg)细胞和巨核细胞的鉴别、骨髓转移腺癌细胞与白血病细胞的鉴别。